Báo cáo khoa học: Sự tồn tại của một điểm nóng tích hợp (integration hotspot) trong bộ gen bò có lợi cho biểu hiện gen ngoại lai khi sử dụng integrase C31
Ngành:
Di truyền học, Sinh học phân tử
Tóm tắt nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này đã xác định một điểm nóng tích hợp mới trong bộ gen bò, được gọi là BF4, nơi việc tích hợp gen ngoại lai với sự hỗ trợ của integrase C31 diễn ra hiệu quả và dẫn đến biểu hiện gen cao. Các nhà khoa học đã phát hiện hai vị trí pseudo attP mới, BF4 và BF10, trong bộ gen bò và đánh giá tần suất tích hợp tại các vị trí này. Kết quả cho thấy BF4 có tần suất tích hợp cao nhất (74%) và biểu hiện gen GFP cao hơn đáng kể so với BF10 và các vị trí khác. Nghiên cứu đề xuất rằng việc tận dụng điểm nóng BF4 có thể là một chiến lược hiệu quả để tạo ra động vật biến đổi gen với biểu hiện gen mục tiêu.
Mục lục chi tiết:
- Tóm tắt
- Giới thiệu
- Kết quả
- Xác định hai vị trí pseudo attP từ nguyên bào sợi với biểu hiện protein huỳnh quang xanh lục (GFP) cao hoặc thấp
- Tần suất tích hợp của bốn vị trí pseudo attP
- Hồ sơ biểu hiện của các gen được tích hợp tại các vị trí pseudo attP khác nhau
- Thảo luận
- Thủ tục thực nghiệm
- Nuôi cấy tế bào nguyên phát
- Plasmid, chuyển gen và chọn lọc tế bào
- PCR ngược bán tổ để xác định vị trí
- Lai tại chỗ huỳnh quang
- Phân tích PCR các vị trí tích hợp
- Thử nghiệm biểu hiện GFP đã chuyển gen
- Lời cảm ơn
- Tài liệu tham khảo