Giới thiệu đề tài
Nghiên cứu này tập trung vào việc phân lập, xác định cấu trúc và đánh giá hoạt tính của hai độc tố α-conotoxin mới, SrIA và SrIB, từ ốc biển Conus spurius. Các độc tố này là peptide 18 axit amin với trình tự hoàn toàn mới, thuộc kiểu khung 4/7. Hoạt tính của chúng được so sánh với α-conotoxin EI, một độc tố đối chứng từ Conus ermineus, trên các thụ thể acetylcholine nicotinic (nAChRs) khác nhau bao gồm α1β1γδ, α4β2 và α3β4, sử dụng kỹ thuật patch-clamp.
Kết quả cho thấy SrIA, SrIB và một chất tương tự tổng hợp của chúng ([γ15E]SrIB) thể hiện ái lực cao trong việc điều hòa và tăng cường phản ứng cholinergic của thụ thể α1β1γδ và α4β2, đồng thời chỉ thể hiện ái lực thấp trong việc ức chế các thụ thể này ở nồng độ cao (10 μm). Ngược lại, EI cho thấy khả năng ức chế mạnh các thụ thể α1β1γδ, α3β4 và α4β2. Đặc biệt, cả các độc tố mới và EI đều cho thấy khả năng điều hòa và tăng cường hoạt động của thụ thể α1β1γδ và α4β2 với ái lực rất cao (EC50 lần lượt là 1.78 và 0.37 nm) khi được ứng dụng trong thời gian ngắn (2–15 giây) ở nồng độ thấp hơn nhiều.
Những đặc tính độc đáo này cho thấy các độc tố α-conotoxin mới và EI không chỉ hoạt động như các chất ức chế nAChRs mà còn có khả năng tăng cường phản ứng cholinergic nội tại của chúng. Điều này mở ra tiềm năng ứng dụng các độc tố này như những công cụ hữu ích để nghiên cứu sâu hơn về tương tác độc tố-thụ thể và làm mô hình để thiết kế các loại thuốc điều trị có độ đặc hiệu cao.
Ngành
- Neurofarmacologia Marina
- Neurobiologia Celular e Molecular
- Biotecnologie e Bioscienze
- Medicina Molecular e Bioprocesos
Tóm tắt nội dung tài liệu
Nghiên cứu mô tả quá trình phân lập, đặc điểm cấu trúc và hoạt tính của hai độc tố α-conotoxin mới, SrIA và SrIB, từ ốc biển Conus spurius. Các độc tố này, với 18 axit amin và trình tự mới, được so sánh với α-conotoxin EI về khả năng tương tác với các thụ thể acetylcholine nicotinic (nAChRs) α1β1γδ, α4β2 và α3β4 bằng kỹ thuật patch-clamp. Kết quả cho thấy SrIA và SrIB có khả năng tăng cường hoạt động của nAChRs α1β1γδ và α4β2 với ái lực cao, trong khi EI chủ yếu thể hiện khả năng ức chế mạnh các nAChRs này. Các độc tố mới và EI đều cho thấy ái lực rất cao trong việc điều hòa nAChRs α1β1γδ và α4β2.
Mục lục chi tiết
- Keywords: α-conotoxin; conotoxins; Conus spurius; nicotinic receptor; potentiation
- Correspondence
- Present address
- Abstract
- Abbreviations
- Structure-function relationship for SrIA, SrIB, and El
- The physiologic role of the SrI and El α-conotoxins
- Experimental procedures
- Specimen collection and venom extraction
- Peptide purification by RP-HPLC
- Amino acid sequence
- MS analysis
- Determination of disulfide bridges
- cDNA cloning
- Synthesis of peptides [γ15E]SrIB and El
- Solid-phase peptide synthesis
- Formation of the first disulfide bond
- Acm group removal and formation of the second disulfide bond
- Electrophysiology
- Cell culture
- Solutions
- Patch-clamp recordings
- Acknowledgements
- References