Báo cáo khoa học: Mycobacterium tuberculosis sở hữu enzyme chức năng tổng hợp vitamin C
Ngành: Khoa học Y sinh
Nghiên cứu này đã xác định và mô tả enzyme L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase (Rv1771) từ vi khuẩn Mycobacterium tuberculosis, tác nhân gây bệnh lao. Enzyme này có khả năng xúc tác cho bước cuối cùng trong quá trình tổng hợp vitamin C (axit L-ascorbic). Mặc dù enzyme có thể được biểu hiện trong E. coli, nhưng thu được với số lượng thấp và dễ bị phân hủy. Enzyme thể hiện tính đặc hiệu cao với L-gulono-1,4-lactone và không có hoạt tính với L-galactono-1,4-lactone. Hoạt động của enzyme phụ thuộc vào pH và nhiệt độ, với hiệu quả tối ưu ở pH 7,5-8 và nhiệt độ 39°C. Phát hiện này cho thấy enzyme có thể đóng vai trò quan trọng trong độc lực, bệnh sinh và/hoặc khả năng sống sót của M. tuberculosis trong vật chủ.
Mục lục chi tiết:
- Introduction
- Keywords
- Abbreviations
- Results
- Heterologous expression and purification of the recombinant L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase (Rv1771) of M. tuberculosis
- Characterization of the recombinant L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase of M. tuberculosis
- Presence of L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase activity in M. bovis BCG strain Copenhagen
- Discussion
- Experimental procedures
- Chemicals
- Plasmid construction
- Heterologous expression of the recombinant L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase
- GST affinity chromatography of the recombinant L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase of M. tuberculosis
- Enterokinase cleavage of the GST-tagged L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase
- Concentration of protein fractions on Strataclean beads
- Preparation of crude enzyme extracts from M. bovis BCG
- Assay of L-gulono-1,4-lactone dehydrogenase
- PAGE
- Immunoblotting
- MS
- Protein determination
- Ascorbic acid determination
- Acknowledgements
- References