Giới thiệu đề tài: A Novel Phosphorylated Glycoprotein in the Shell Matrix of the Oyster Crassostrea Nippona
Nghiên cứu này công bố việc phát hiện một glycoprotein ma trận mới, được đặt tên là MPP1, trong vỏ sò Crassostrea nippona. Với trọng lượng phân tử 52 kDa, MPP1 nổi bật bởi tính axit cao và mức độ phosphoryl hóa mạnh mẽ. Phân tích trình tự cDNA cho thấy cấu trúc theo mô-đun, bao gồm các chuỗi lặp lại giàu Asp, Ser và Gly, đặc biệt là chuỗi giàu DE. Các phát hiện chỉ ra rằng MPP1 và các polymer của nó sở hữu khả năng tích lũy và giữ Ca2+, đóng vai trò thiết yếu trong quá trình khoáng hóa vỏ sò. Đáng chú ý, MPP1 được xác định là thành phần ma trận hữu cơ đầu tiên được biểu hiện đồng thời ở cả lớp phiến và lớp lăng trụ của cấu trúc vỏ động vật thân mềm. Các thử nghiệm kết tinh trong ống nghiệm đã chứng minh khả năng của MPP1 trong việc điều khiển sự phát triển tinh thể và định hình cấu trúc vỏ.
Ngành:
Sinh học Tế bào, Khoa Sức khỏe Môi trường, Đại học Azabu, Sagamihara, Nhật Bản.
Tóm tắt nội dung tài liệu:
Nghiên cứu mô tả việc phát hiện glycoprotein ma trận mới MPP1 (52 kDa) trong vỏ sò Crassostrea nippona. Protein này có tính axit cao, được phosphoryl hóa mạnh, cấu trúc mô-đun với các chuỗi lặp lại giàu Asp, Ser, Gly và DE. MPP1 có khả năng tích lũy và giữ Ca2+, quan trọng cho quá trình khoáng hóa vỏ. Nó là thành phần ma trận hữu cơ đầu tiên biểu hiện ở cả lớp phiến và lớp lăng trụ. Thử nghiệm in vitro cho thấy MPP1 điều khiển sự phát triển tinh thể và cấu trúc vỏ.
Mục lục chi tiết:
- Keywords
- Correspondence
- Database
- Abstract
- Introduction
- Results
- Biochemical characterization of the OM components extracted from oyster shell
- Figure 1. SDS/PAGE electrophoretogram of GISM in the OM of C. nippona.
- Table 1. Amino acid compositions of the 52 kDa component and the SM of C. nippona together with that of the deduced 44 kDa protein.
- Figure 2. SDS/PAGE electrophoretogram of (A) dephosphorylated GISM and (B) deglycosylated GISM.
- Figure 3. FTIR spectrum of the GISM fraction.
- Cloning and sequencing of cDNA encoding the OM component in the foliated layer
- Figure 4. Nucleotide sequence of the 1.9 kb cDNA and deduced amino acid sequence.
- Deduced protein structure encoded by the 1.9 kb cDNA
- Figure 5. Schematic representation of the domain structures of MPP1 and MSP-1.
- Figure 6. Alignment of the amino acid sequences of MPP1 and MSP-1.
- Tissue specific expression of a transcript of the 1.9 kb cDNA
- Figure 7. Electrophoretogram of a transcript of the 1.9 kb cDNA by northern hybridization.
- In vitro assay of OM activity
- Figure 8. Surface views of crystals induced by 'CaCO3 crystal growth assay'.
- Figure 9. Recordings of CaCO3 precipitation by 'CaCO3 precipitation assay'.
- Discussion
- Experimental procedures
- Molluscan materials
- Extraction and purification of the organic matrix proteins
- Amino acid composition and N-terminal sequence analysis
- Enzymatic digestion and LC/MS/MS analysis
- Deglycosylation and dephosphorylation experiments
- FTIR analysis
- cDNA cloning
- Tissue collection for RNA extraction
- Total RNA extraction
- PCR amplification
- TA cloning
- Sequencing
- Northern blot hybridization
- In vitro crystallization assay
- Acknowledgements
- References