Giới thiệu
Tên đề tài: KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: XÁC ĐỊNH QUY TRÌNH LY TRÍCH DNA TỪ LÔNG HEO
Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Tóm tắt nội dung tài liệu:
Đề tài "XÁC ĐỊNH QUY TRÌNH LY TRÍCH DNA TỪ LÔNG HEO" được thực hiện nhằm mục đích tìm kiếm một quy trình tối ưu cho việc ly trích DNA từ nhiều nguồn lông khác nhau, đặc biệt là từ lông heo. Nghiên cứu này tập trung vào việc xác định vị trí lấy mẫu tốt nhất trên sợi lông để thu được DNA có chất lượng cao nhất và đánh giá hiệu quả của quy trình ly trích thông qua tỷ số OD và phản ứng PCR với đoạn mồi phát hiện gen halothane.
Các kết quả nghiên cứu cho thấy:
- Sử dụng các nồng độ buffer ly trích chứa proteinase K khác nhau (0.8 mg/ml, 1 mg/ml, 1.2 mg/ml) đều cho chất lượng DNA tốt với tỷ số OD dao động từ 1.75 - 1.84.
- DNA được ly trích với DTT ở nồng độ 50 mM cho kết quả tinh sạch (OD = 1.65) và có thể sử dụng cho phản ứng PCR.
- Sử dụng CTAB 0.2% cho DNA tinh sạch với tỷ số OD trung bình là 1.80 và cho phép khuếch đại gen halothan hiệu quả.
- Vị trí gốc lông cho DNA ly trích tinh sạch nhất (OD = 2.05), tiếp theo là thân lông (OD = 1.84), cả sợi lông (OD = 1.75) và ngọn lông (OD = 1.4).
- Phản ứng PCR khuếch đại gen halothane có tỷ lệ thành công cao nhất đối với mẫu gốc lông (70%), tiếp theo là mẫu thân lông (60%) và cả sợi lông (50%). Phản ứng PCR không thành công với mẫu ngọn lông.
Nghiên cứu này cung cấp một quy trình ly trích DNA từ lông heo hiệu quả, mở ra tiềm năng ứng dụng trong nhiều lĩnh vực như khoa học hình sự, khảo cổ học và nghiên cứu di truyền.
Mục lục chi tiết:
- Lời cảm ơn
- Tóm tắt khóa luận
- Mục lục
- Danh sách các chữ viết tắt
- Danh sách các bảng
- Danh sách các hình và biểu đồ
- PHẦN I. MỞ ĐẦU
- 1.1. Đặt vấn đề
- 1.2. Mục tiêu và yêu cầu
- 1.2.1. Mục tiêu
- 1.2.2. Yêu cầu
- PHẦN II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
- 2.1. Cấu trúc của lông
- 2.1.1. Cấu trúc tổng quan
- 2.1.2. Cấu trúc của melanin
- 2.1.3. Cấu trúc của keratin
- 2.1.4. Các liên kết trong lông
- 2.1.4.1. Liên kết cuộn xoắn A
- 2.1.4.2. Liên kết trong protein keratin
- 2.1.4.3. Liên kết hydrogen
- 2.1.4.4. Liên kết muối
- 2.1.4.5. Liên kết cystine
- 2.1.4.6. Liên kết đường
- 2.1.5. Chu kỳ phát triển của lông heo
- 2.2. Những công trình tách chiết DNA từ lông
- 2.2.1. Những công trình tách chiết DNA từ lông ở nước ngoài
- 2.2.2. Những công trình tách chiết DNA từ lông ở trong nước
- 2.3. Phản ứng PCR (polymerase chain reaction)
- 2.3.1. Nguyên tắc cơ bản của PCR
- 2.3.2. Những thành phần tham gia vào phản ứng PCR
- 2.4. Gen halothane
- 2.4.1. Khái quát về gen halothane
- 2.4.2. Ảnh hưởng của gen halothane
- 2.4.2.1. Ảnh hưởng của gen halothane đến năng suất sinh sản
- 2.4.2.2. Ảnh hưởng của gen halothane đến sinh trưởng và phẩm chất thịt
- 2.5. Những công trình nghiên cứu về halothane
- 2.5.1. Nguyên tắc xác định gen halothane
- 2.5.2. Những công trình nghiên cứu halothane ở nước ngoài
- 2.5.3. Những công trình nghiên cứu halothane trong nước
- PHẦN III. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
- 3.1. Nội dung nghiên cứu
- 3.2. Địa điểm và thời gian tiến hành
- 3.3. Vật liệu
- 3.3.1. Nguồn mẫu chiết xuất DNA
- 3.3.2. Đoạn mồi
- 3.3.3. Hóa chất
- 3.3.4. Dụng cụ và thiết bị dùng trong đề tài
- 3.3.4.1. Dụng cụ
- 3.3.4.2. Thiết bị
- 3.4. Phương pháp tiến hành
- 3.4.1. Lấy và trữ mẫu
- 3.4.2. Tách chiết DNA
- 3.4.2.1. Thiết lập quy trình ly trích DNA từ lông heo
- 3.4.2.2. Áp dụng quy trình ly trích DNA lên các vị trí khác nhau của lông heo
- 3.4.3. Định lượng DNA bằng quang phổ kế
- 3.4.4. Thực hiện phản ứng PCR
- 3.4.5. Điện di và quan sát kết quả
- 3.4.5.1. Chuẩn bị gel agarose
- 3.4.5.2. Đọc kết quả
- 3.5. Xử lý số liệu
- PHẦN IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
- 4.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng độ proteinase K
- 4.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát nồng độ DTT
- 4.3. Thí nghiệm 3: Khảo sát nồng độ CTAB
- 4.4. Thí nghiệm 4: Áp dụng quy trình ly trích DNA lên các vị trí lông heo
- PHẦN V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
- 5.1. Kết luận
- 5.2. Đề nghị
- VI. TÀI LIỆU THAM KHẢO