Nghiên cứu Đặc điểm phân tử sơ bộ và Kết tinh Phức hợp hô hấp ty thể II từ tim lợn
Ngành:
Sinh hóa, Sinh học cấu trúc
Tóm tắt nội dung tài liệu:
Nghiên cứu này tập trung vào việc đặc tính hóa phân tử sơ bộ và kết tinh phức hợp hô hấp ty thể II (succinate:ubiquinone oxidoreductase) từ tim lợn. Phức hợp này đóng vai trò quan trọng trong chu trình Krebs và hô hấp hiếu khí. Các tác giả đã thực hiện phân tích RT-PCR để xác định trình tự gen và tín hiệu peptide định vị ty thể của từng tiểu đơn vị. Phức hợp II được chiết xuất và tinh chế từ tim lợn bằng phương pháp kết tủa amoni sulfat, hòa tan với n-decyl-β-D-maltoside và ổn định bằng sucrose. Quá trình kết tinh được thực hiện với poly(ethylene glycol) 4000. Bài báo cũng chi tiết hóa các yếu tố quan trọng, phương pháp thực nghiệm cho việc chiết xuất, tinh chế và kết tinh, bao gồm cả thiết kế mồi, phiên mã ngược và PCR.
Mục lục chi tiết:
- Keywords
- Correspondence
- The mitochondrial respiratory complex II, or succinate:ubiquinone oxidoreductase, is an integral membrane protein complex...
- Mitochondria are cellular organelles of prokaryotic origin that are found in almost all eukaryotic cells...
- Abbreviations
- Results and Discussion
- The mitochondrial respiratory complex II preparation was extracted and purified from porcine heart...
- Fig. 1. SDS-PAGE analysis of the crystallization preparation and the crystal of complex II...
- Fig. 2. The complex II crystals...
- Fig. 3. A typical X-ray diffraction pattern from a native mitochondrial complex II crystal.
- Table 1. Data collection statistics. SAD, single-wavelength anomalous diffraction.
- Experimental procedures
- Extraction, purification and crystallization of mitochondrial complex II from porcine heart
- Primer design, reverse transcription and the PCR
- N-terminal sequence for signal peptide
- Acknowledgements
- References
- Supplementary material