Giới thiệu
Nghiên cứu này tập trung vào các enzyme 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase (tên đề tài gốc) có nguồn gốc từ nấm men Candida glabrata, vi khuẩn cổ Methanocaldococcus jannaschii và vi khuẩn Aquifex aeolicus. Các enzyme này đóng vai trò quan trọng trong việc chuyển hóa 2,5-diamino-6-ribosylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate thành sản phẩm cuối cùng là 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate.
Bên cạnh đó, công trình cũng làm sáng tỏ vai trò thiết yếu của các enzyme này trong con đường sinh tổng hợp riboflavin (vitamin B2), một coenzyme không thể thiếu cho nhiều quá trình trao đổi chất quan trọng trong cơ thể sinh vật. Một điểm nhấn của nghiên cứu là việc chỉ ra những khác biệt đáng kể trong con đường sinh tổng hợp riboflavin giữa các giới sinh vật khác nhau, bao gồm vi khuẩn cổ, vi khuẩn, nấm và thực vật, đặc biệt là ở bước khởi đầu của quá trình tổng hợp.
Tên đề tài:
2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthases of fungi and archaea
Ngành:
Hóa sinh, Sinh học phân tử
Mục lục chi tiết:
- Introduction
- Results
- Pyrimidine reductase families
- Enzyme preparation and quaternary structure
- Experimental procedures
- Materials
- Strains and plasmids
- Transformation
- Cloning of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase from C. glabrata (CgIRED)
- Preparation of a synthetic gene for 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase from A. aeolicus
- Fermentation
- Purification of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase from C. glabrata
- Purification of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase from A. aeolicus
- Analytical ultracentrifugation
- NMR spectroscopy
- Assay of 2,5-diamino-6-ribitylamino-4(3H)-pyrimidinone 5'-phosphate synthase activity
- Multiple sequence alignment
- Acknowledgements
- References
- Supporting information