Tên đề tài:
Nghiên cứu nhân dòng và biểu hiện gen LipL21 mã hóa cho Lipoprotein từ Leptospira interrogans trong Escherichia coli
Ngành:
Sinh học thực nghiệm
Tóm tắt nội dung tài liệu:
Luận văn tập trung nghiên cứu gen LipL21, một gen mã hóa Lipoprotein của vi khuẩn Leptospira interrogans, tác nhân gây bệnh Xoắn khuẩn vàng da (Leptospirosis). Mục tiêu chính là nhân dòng và biểu hiện thành công gen LipL21 trong Escherichia coli (E. coli) sử dụng vector biểu hiện pET32a. Nghiên cứu còn bao gồm các bước tinh sạch protein LipL21 tái tổ hợp và đánh giá khả năng đáp ứng miễn dịch của nó.
Nội dung nghiên cứu được trình bày bao gồm:
- Tổng quan về tình hình dịch bệnh Leptospirosis trên thế giới và tại Việt Nam.
- Giới thiệu về vi khuẩn Leptospira, đặc điểm cấu trúc, hệ gen và vai trò của gen LipL21 trong độc lực của vi khuẩn.
- Trình bày nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu, bao gồm nhân dòng gen LipL21 vào vector pJET1.2, biểu hiện gen trong E. coli BL21, cũng như thu nhận, tinh sạch và đánh giá đáp ứng miễn dịch của protein LipL21 tái tổ hợp.
- Trình bày kết quả nghiên cứu về việc tạo vector mang gen LipL21, vector biểu hiện, biểu hiện protein LipL21, tinh sạch, định lượng và kiểm tra đáp ứng miễn dịch trên chuột.
- Đưa ra kết luận và kiến nghị dựa trên kết quả thu được.
Mục lục chi tiết:
- Chương 1: Tổng quan tài liệu
- 1.1. Tổng quan tình hình dịch bệnh Leptospirosis
- 1.1.1. Tổng quan tình hình thế giới
- 1.1.2. Tổng quan tình hình trong nước
- 1.2. Vi khuẩn Leptospira
- 1.2.1. Giới thiệu chung về vi khuẩn Leptospira
- 1.2.2. Đặc điểm cấu trúc và hệ gen vi khuẩn Leptospira
- 1.2.3. Gen LipL21, protein LipL21 liên quan đến độc lực của vi khuẩn Leptospira và tính ứng dụng
- 1.3. Nhân dòng và biểu hiện protein ngoại lai
- 1.3.1. Biểu hiện protein ngoại lai trong E. coli
- 1.3.2. Nhân dòng và biểu hiện gen của vi khuẩn Leptospira interrogans
- Chương 2: Nguyên vật liệu và phương pháp nghiên cứu
- 2.1. Nguyên liệu, máy móc
- 2.1.1. Nguyên liệu và hóa chất
- 2.1.2. Máy móc, dụng cụ thí nghiệm
- 2.2. Phương pháp nghiên cứu
- 2.2.1. Phương pháp nhân dòng gen LipL21 vào vector pJET1.2
- 2.2.2. Phương pháp biểu hiện gen LipL21 trong E. coli BL21
- 2.2.3. Phương pháp thu, tinh sạch, đánh giá khả năng đáp ứng miễn dịch của protein LipL21 tái tổ hợp
- Chương 3: Kết quả và thảo luận
- 3.1. Tạo vector mang gen LipL21
- 3.2. Tạo vector biểu hiện gen LipL21 trong E. coli BL21
- 3.3. Biểu hiện protein LipL21 trong E. coli BL21
- 3.3.1. Biểu hiện protein LipL21 trong E. coli BL21
- 3.3.2. Tối ưu các điều kiện biểu hiện
- 3.4. Tinh sạch, định lượng và kiểm tra đáp ứng miễn dịch của protein LipL21 tái tổ hợp trên chuột
- 3.4.1. Tinh sạch và định lượng protein tái tổ hợp LipL21
- 3.4.2. Đánh giá khả năng đáp ứng miễn dịch của protein LipL21 tái tổ hợp trên chuột
- Chương 4: Kết luận và kiến nghị
- 4.1. Kết luận
- 4.2. Kiến nghị
- Tài liệu tham khảo