Giới thiệu
Nghiên cứu này tập trung vào một phản ứng phụ độc đáo của enzyme ferredoxin-NADP+ reductase (FNR) loại adrenodoxin reductase (AdR), đó là quá trình oxy hóa NADP+ thành dẫn xuất 4-oxo của nó, 3-carboxamide-4-pyridone adenine dinucleotide phosphate (NADPO). Phản ứng này diễn ra chậm, yêu cầu sự có mặt của FAD gắn trên enzyme và đặc hiệu tại vị trí C4 của vòng nicotinamide trong NADP+. Các nghiên cứu biến đổi protein đã xác nhận rằng các gốc amino acid Glu214 và His57 không đóng vai trò xúc tác. Kết quả thực nghiệm cho thấy bước tấn công ái lực của phân tử nước vào vòng nicotinamide là bước khởi đầu và quyết định tốc độ của cơ chế phản ứng. Điểm đáng chú ý là các FNR loại thực vật không thể thực hiện phản ứng này, nhấn mạnh tính đặc trưng của FNR loại AdR. NADPO được xác định là một chất ức chế cạnh tranh đối với NADPH trên nhiều loại FNR, mở ra tiềm năng ứng dụng như một công cụ hữu ích để nghiên cứu vị trí gắn kết cơ chất của các enzyme phụ thuộc NADPH.
Mục lục chi tiết:
- Giới thiệu
- Kết quả và Thảo luận
- Phân lập, định lượng và đặc tính quang phổ của NADPO
- Các FNR loại thực vật không xúc tác sự hình thành NADPO
- Vai trò của O2 trong quá trình oxy hóa NADP+ do enzyme xúc tác
- Động học của sự hình thành NADPO do FprA và AdR xúc tác
- Điều tra vai trò của Glu214 và His57 của FprA trong quá trình xúc tác tạo NADPO
- NADPO như một chất ức chế FNR
- Quy trình thực nghiệm
- Xác định các loài oxy phản ứng được tạo ra trong phản ứng giữa NADP+ và O2 do FprA xúc tác
- Các xét nghiệm hoạt tính enzyme
- Nghiên cứu liên kết phối tử
- Lời cảm ơn
- Tài liệu tham khảo